深度解析医学证据，DeepEvidence为你支撑决策 传统呼吸道研究广泛使用在标准塑料器皿上液下培养的未分化或转化的上皮细胞系，因其操作简便且易于规模化，但此类模型缺乏天然气道上皮的细胞多样性，导致实验结果转化价值受限。相比之下，气液界面培养虽能重建包含基底细胞、分泌细胞和纤毛细胞的复层上皮，却依赖昂贵的专用耗材且通量较低。为弥合这一差距，本研究建立了一种新的分化方法，利用冷冻保存的人鼻腔刷取细胞，在常规培养塑料上通过小分子抑制剂靶向调控Notch和BMP信号通路，实现了液下条件下的上皮分化。 研究使用健康供者鼻腔刷取物来源的冷冻基底细胞，在常规多孔板中培养至汇合后，将培养基更换为添加了γ-分泌酶抑制剂DAPT和BMP抑制剂DMH1的分化培养基，持续培养21至42天。单独抑制Notch通路不足以诱导鼻上皮细胞的纤毛分化，而DAPT与DMH1联合处理显著增加了β-微管蛋白IV阳性的纤毛细胞数量。MUC5AC阳性分泌细胞在各条件下的比例保持稳定，提示在液下培养中分泌细胞的分化相对独立于这两条信号通路的调控。分化后的上皮呈现顶端纤毛细胞、基底侧p63阳性基底细胞的空间组织特征，并在转录水平